Western蛋白印迹试验（Western Blot，WB）

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Western蛋白印迹试验（Western Blot，WB）

作者：Western 来自：Western 点击数：843 加入时间：2006-10-18

本法是用含有去垢剂的缓冲液将感染的H9细胞溶解，经梯度超速离心提取可溶性病毒蛋白。病毒蛋白先沿纵轴方向在10%丙烯酰胺凝胶上用SDS—PAGE分离，再沿水平方向电泳移转并吸附于硝化纤维上，然后将该膜置于无免疫性蛋白溶液中（通常用牛血清白蛋白）。清洗后将待测血清和对照物培育，当血清HIV抗体阳性时，抗体结合到膜上的病毒蛋白上，最后用同位素标记的抗人IgG检测。如能检测出HIV蛋白抗原即为阳性，如仅P24阳性，则结果可疑，就对原标本重判。
WB试验能检测到gp120，p66，p51，gp41，p31，p24和17Kda的抗原。其敏感性较ELISA高，但比RIPA为差。并可用HIV—1和HIV—2划分。由于自身抗体的存在，仍有假阳性。

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